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白菜类蔬菜亲缘关系的AFLP 分析

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白菜类蔬菜亲缘关系的AFLP 分析

园 艺 学 报 2001,28(4):331~335白菜类蔬菜亲缘关系的AFLP分析

孙德岭1 赵前程2 宋文芹1 陈瑞阳1

2(1南开大学生命科学学院,天津300192; 天津市蔬菜研究所,天津300384)

摘 要:利用AFLP分子标记技术对白菜类蔬菜间的亲缘关系进行了研究。使用10对选择性引物组合,扩增出4173条扩增带,并对其进行聚类分析。结果表明:芜菁与结球白菜和不结球白菜亲缘关系远;而结球白菜与鸡冠菜和毛白菜亲缘关系较近,与其它不结球白菜亲缘关系较远。从分子水平上分析了薹菜、菜薹、柴乌、箭杆白、马耳朵白等不结球白菜类蔬菜之间的亲缘关系。

关键词:白菜类;AFLP;亲缘关系

中图分类号:S634  文献标识码:A  :0513(白菜类蔬菜包括不结球白菜、,因其品种类型丰富、亲缘关系复杂,,、生理性

1~5〕

状、,对其进行过多方面的研究和论证〔,但

6〕

,存有争议〔。本研究采用AFLP分子标记技术,从分子水平,为研究白菜类蔬菜起源、演化及分类提供理论依

据。

1 材料与方法

供试材料由天津市蔬菜研究所及中国农业科学院蔬菜花卉研究所资源库提供(表1)。1.1 DNA提取

7〕

取叶片在液氮冷冻条件下用研钵研碎。DNA的提取参照Murray的CTAB法〔。提取到

的DNA经0.7%琼脂糖凝胶电泳与已知浓度的CambdaDNA进行对比,对提取的总DNA进行检测。1.2 AFLP分析

8〕

参照Vos等〔的方法,AFLP试剂盒购自GIBCO2BRL公司。每个样品总DNA250ng,经限制内切酶EcoRⅠ和MseⅠ消化后,在消化片段末端加上人工接头。共用了10个EcoRⅠ引物(E1:E+ACC,E2:E+AAC,E3:E+ACA,E4:E+ACC,E5:E+ACT,E6:E+AGC,E7:E+AAC,E8:E+AAC,E9:E+ACA,E10:AGC)和10个MseⅠ引物(M1:M+CTC,M2:M+CTT,M3:M+CTG,M4:M+CTG,M5:M+CAC,M6:M+CTC,M7:M+CAG,M8:M+CTC,M9:M+CTT,M10:M+CAA),其中E和M分别表示EcoRⅠ引

物和Mse引物共同序列,E表示的共同序列为5’2GACTGCGTACCAATTC23’,M表示的共同序列为5’2GATGAGTCCTCACTAA23’,E与M后的3个碱基为选择性碱基,分别接在E和M

收稿日期:2000-11-24;修回日期:2001-04-06




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